二手賽默飛熒光定量PCR儀QuantStudio 3（Q3）使用價值與技術解析

一、引言

熒光定量PCR（qPCR）是一種廣泛應用于基因表達分析、病原體檢測、SNP 分型、拷貝數(shù)變異（CNV）研究等領域的分子生物學技術。美國賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）旗下的Applied Biosystems（ABI）系列是其中一個被廣泛使用的qPCR平臺品牌，其推出的QuantStudio系列因其系統(tǒng)穩(wěn)定性、操作便捷和擴展能力等特點，在眾多科研及檢測機構中得到較多應用。

QuantStudio 3（簡稱Q3）是該系列入門型號之一。相較于高通量版本如QuantStudio 5/6/7 Pro，Q3定位于常規(guī)科研、教學實驗室及中等通量需求場所。本文將以二手Q3設備為研究對象，從儀器構成、運行機制、技術性能、操作流程、應用范圍、數(shù)據(jù)輸出、維護要點、二手市場價值、適用實驗場景及采購建議等多個方面進行全面介紹，旨在幫助用戶科學判斷其在當前實驗需求中的適配度。

二、儀器構成與基本參數(shù)

1. 主機結構

QuantStudio 3 qPCR系統(tǒng)整合熱循環(huán)模塊與熒光檢測光路為一體，采用封閉式光學系統(tǒng)。其結構緊湊，便于放置于標準實驗臺面或生物安全柜中。外殼材質為ABS復合材料，兼具機械強度與輕便性。主機頂部為樣品倉，配有自動加熱蓋；正面嵌入彩色觸控屏用于運行設置和狀態(tài)查看。

2. 熱循環(huán)模塊

• 樣品通量：標準96孔（0.2 mL管或96孔板）

• 升溫速率：約3.0 °C/s

• 降溫速率：約3.0 °C/s

• 溫度均一性：±0.25 °C（30 秒內）

• 溫控精度：±0.15 °C

• 加熱蓋溫度：默認設置為105 °C，可調范圍90–110 °C

3. 光學檢測系統(tǒng)

QuantStudio 3 配備6通道光學檢測模塊，支持多重熒光通道采集。

ROX通道可用于熒光校正（Passive Reference）。該系統(tǒng)不需用戶更換濾光片，所有通道在同一次反應中可自動切換采集。

三、系統(tǒng)軟件與數(shù)據(jù)分析能力

1. 軟件平臺

QuantStudio 3 配套使用Design & Analysis Software（DA軟件），支持Windows平臺。用戶可通過觸屏或遠程PC登錄方式進行程序設置與結果分析。軟件界面圖形化程度較高，便于初學者快速掌握。

主要功能包括：

• 實時熒光曲線顯示

• Ct值自動計算

• 基線和閾值自動調整

• 熔解曲線分析

• 相對表達分析（ΔΔCt）

• 絕對定量分析（標準曲線法）

• 拷貝數(shù)變異分析

• 熒光信號平滑與背景扣除功能

2. 數(shù)據(jù)導出格式

支持導出結果至CSV、TXT、PDF、Excel等格式，方便在第三方軟件（如GraphPad Prism、SPSS等）中進行后續(xù)統(tǒng)計分析。也可將原始實驗數(shù)據(jù)包（.eds格式）導入更高級的分析平臺（如Thermo Cloud）進行遠程存儲和多用戶協(xié)作。

四、典型應用場景

QuantStudio 3 適合下列實驗類型：

• 基因表達定量：相對定量（如炎癥因子IL-6、TNF-α表達比較）、絕對定量（如病毒載量評估）。

• 突變檢測與SNP分型：配合探針法識別堿基替換，適合小規(guī)模遺傳篩查。

• 微生物與病毒檢測：在食品安全、臨床分子診斷（如HBV、SARS-CoV-2 qPCR篩查）中可用于常規(guī)陽性/陰性判斷。

• 拷貝數(shù)變異（CNV）分析：需配合標準化引物探針庫。

• 教學與培訓實驗：適合高校生命科學、醫(yī)學等專業(yè)教學平臺入門使用。

五、操作流程簡要

典型qPCR實驗操作流程如下：

1. 模板與反應體系準備：DNA/cDNA樣本、引物、熒光染料或探針，配置總反應體系體積（20 µL或25 µL）。

2. 裝板并封板：使用0.2 mL反應管或96孔PCR板，封板膜密封，避免蒸發(fā)。

3. 插入儀器并設定程序：

• 酶激活（95 °C，2–10 min）

• 擴增循環(huán)（95 °C 15 s，60 °C 60 s ×40 cycles）

4. 選擇染料、設置檢測通道；

5. 開始運行與實時監(jiān)控；

6. 結果導出與分析：Ct值計算、圖像保存、熔解曲線判斷。

六、維護與日常檢查

雖為二手設備，QuantStudio 3若保養(yǎng)得當，其運行壽命依然可持續(xù)5–8年。