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賽默飛Thermo實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 CFX96 特點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2025/1/9點(diǎn)擊次數(shù):68

賽默飛Thermo實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 CFX96 全面介紹

實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Polymerase Chain Reaction, qPCR)是一種基于熒光信號(hào)檢測(cè)的分子生物學(xué)技術(shù),用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和定量分析DNA或RNA擴(kuò)增過程。賽默飛(Thermo Fisher Scientific)作為生命科學(xué)技術(shù)公司,其CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以高靈敏度、高準(zhǔn)確性和靈活性廣受認(rèn)可,是一款適用于科研、臨床診斷以及工業(yè)應(yīng)用的高性能儀器。本文將從CFX96的特點(diǎn)、技術(shù)參數(shù)、操作流程及應(yīng)用領(lǐng)域等方面,全面介紹這一儀器。


一、儀器概述

賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款以96孔板為基礎(chǔ)的高通量、高靈敏度的qPCR儀器。CFX96專為滿足基因檢測(cè)、表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、基因分型及突變研究等多種實(shí)驗(yàn)需求而設(shè)計(jì)。其核心特點(diǎn)是擁有強(qiáng)大的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、快速高效的溫控系統(tǒng)以及直觀易用的軟件支持,為用戶提供了靈活的實(shí)驗(yàn)方案和可靠的數(shù)據(jù)支持。

CFX96兼容多種熒光標(biāo)記體系(如SYBR Green、TaqMan探針等),具有開放式平臺(tái)設(shè)計(jì),適應(yīng)性強(qiáng)。儀器通過精準(zhǔn)的熒光信號(hào)檢測(cè)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品擴(kuò)增過程的實(shí)時(shí)監(jiān)控,為科學(xué)研究提供精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。


二、主要特點(diǎn)

1. 多通道光學(xué)系統(tǒng)

CFX96配備了先進(jìn)的5通道光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),可同時(shí)監(jiān)測(cè)多達(dá)5種熒光信號(hào)。這種多通道設(shè)計(jì)支持多靶標(biāo)檢測(cè),使得單次實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驒z測(cè)多種基因,為基因表達(dá)研究和復(fù)雜分子診斷提供了強(qiáng)大的工具。

2. 高靈敏度和寬動(dòng)態(tài)范圍

CFX96采用高性能光學(xué)檢測(cè)模塊,能夠檢測(cè)低至單拷貝的DNA或RNA,靈敏度。同時(shí),其寬動(dòng)態(tài)范圍允許從高濃度到低濃度樣品的準(zhǔn)確定量分析,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

3. 快速高效的溫控系統(tǒng)

CFX96使用Peltier加熱模塊,提供了快速升降溫的能力,使PCR反應(yīng)更高效。其溫控均一性可達(dá)±0.2℃,在樣品間提供一致的擴(kuò)增條件,確保數(shù)據(jù)的可靠性。

4. 靈活的試劑兼容性

CFX96是一款開放式平臺(tái),支持多種試劑體系,如SYBR Green染料、TaqMan探針和分子信標(biāo)等。用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇適合的試劑和耗材,降低實(shí)驗(yàn)成本,同時(shí)提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的靈活性。

5. 用戶友好的軟件系統(tǒng)

CFX96配備了強(qiáng)大的配套軟件,支持以下功能:

  • 絕對(duì)定量:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法確定未知樣品的濃度;

  • 相對(duì)定量:分析不同條件下目標(biāo)基因的表達(dá)變化;

  • 基因分型:區(qū)分不同基因型;

  • 熔解曲線分析:用于區(qū)分特異性擴(kuò)增和非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物;

  • 突變分析:用于基因突變位點(diǎn)檢測(cè)。

軟件界面簡(jiǎn)潔直觀,實(shí)驗(yàn)設(shè)置和數(shù)據(jù)分析功能豐富,降低了用戶的操作難度。此外,軟件支持實(shí)驗(yàn)報(bào)告自動(dòng)生成和多種數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式,便于實(shí)驗(yàn)結(jié)果分享和歸檔。

6. 高通量能力

CFX96支持96孔板格式,適合中高通量實(shí)驗(yàn)需求。其快速PCR模式可顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,為時(shí)間緊迫的實(shí)驗(yàn)提供了解決方案。

7. 緊湊設(shè)計(jì)與多功能性

CFX96設(shè)計(jì)緊湊,占用實(shí)驗(yàn)室空間小,適合各類實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。其靈活性和多功能性使其在科研和應(yīng)用實(shí)驗(yàn)中都表現(xiàn)出色。


三、技術(shù)參數(shù)

1. 光學(xué)性能

  • 光學(xué)系統(tǒng):5通道獨(dú)立光學(xué)檢測(cè);

  • 熒光染料:支持SYBR Green、FAM、HEX、VIC、ROX、Texas Red、Cy5等多種熒光標(biāo)記;

  • 動(dòng)態(tài)范圍:可檢測(cè)10個(gè)數(shù)量級(jí);

  • 靈敏度:?jiǎn)慰截惏袠?biāo)檢測(cè)。

2. 溫控性能

  • 樣品模塊:96孔板;

  • 溫控范圍:4℃至99.9℃;

  • 溫控均一性:±0.2℃;

  • 升降溫速度:最高可達(dá)5℃/秒。

3. 數(shù)據(jù)分析

  • 分析功能:支持標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制、Ct值計(jì)算、熔解曲線分析、基因分型等;

  • 導(dǎo)出格式:兼容.xlsx、.txt、.pdf等多種格式。

4. 兼容性

  • 試劑:支持多種熒光染料和探針試劑;

  • 耗材:適配標(biāo)準(zhǔn)96孔板及PCR管。

5. 尺寸與重量

  • 儀器尺寸:約33 cm × 50 cm × 50 cm;

  • 重量:約30 kg。


四、操作流程

1. 樣品制備

從實(shí)驗(yàn)材料(如組織、血液、細(xì)胞)中提取DNA或RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA(若為RNA樣品)。配置PCR反應(yīng)體系,包括引物、探針或熒光染料、反應(yīng)緩沖液及模板DNA或cDNA。

2. 儀器設(shè)置

  • 打開CFX96儀器,啟動(dòng)軟件;

  • 根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇檢測(cè)模式(SYBR Green、TaqMan探針等);

  • 配置擴(kuò)增程序,包括退火溫度、循環(huán)次數(shù)等;

  • 分配熒光通道和目標(biāo)基因信息。

3. 實(shí)驗(yàn)運(yùn)行

將樣品加載至96孔板中并密封,將樣品板放入儀器中,啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)程序。CFX96將實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過程并記錄熒光信號(hào)。

4. 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)完成后,軟件自動(dòng)生成擴(kuò)增曲線、Ct值和熔解曲線等實(shí)驗(yàn)結(jié)果。用戶可以進(jìn)一步分析數(shù)據(jù),并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求導(dǎo)出或保存結(jié)果。


五、應(yīng)用領(lǐng)域

CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀因其高靈敏度、多功能性和靈活性,被廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:

1. 基因表達(dá)研究

利用相對(duì)定量方法,研究目標(biāo)基因在不同條件下的表達(dá)水平,為基因功能研究和生物學(xué)機(jī)制探索提供數(shù)據(jù)支持。

2. 病原體檢測(cè)

檢測(cè)和定量分析微生物、病毒和其他病原體的核酸,廣泛應(yīng)用于傳染病診斷、食品安全檢測(cè)及環(huán)境監(jiān)測(cè)。

3. 基因分型

通過熒光信號(hào)區(qū)分不同基因型,應(yīng)用于個(gè)體化醫(yī)療、遺傳病篩查和藥物基因組學(xué)研究。

4. 突變分析

檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性(SNP)和基因突變,用于癌癥研究、藥物開發(fā)及精準(zhǔn)醫(yī)療。

5. 分子診斷

CFX96在遺傳性疾病檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物分析和藥物靶點(diǎn)研究中具有重要作用,為分子診斷領(lǐng)域提供技術(shù)支持。

6. 藥物研發(fā)

支持高通量基因表達(dá)篩選和藥物毒理學(xué)研究,用于分析藥物對(duì)基因表達(dá)的影響和潛在靶點(diǎn)的篩選。


六、優(yōu)勢(shì)總結(jié)

  1. 高性能光學(xué)系統(tǒng):CFX96支持多通道實(shí)時(shí)檢測(cè),提供精確可靠的數(shù)據(jù)。

  2. 靈活開放的設(shè)計(jì):兼容多種試劑和耗材,適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求。

  3. 高通量能力:96孔板設(shè)計(jì)適合中高通量實(shí)驗(yàn),支持快速模式。

  4. 用戶友好軟件:操作簡(jiǎn)單,數(shù)據(jù)分析功能強(qiáng)大,適合不同層次用戶。

  5. 廣泛應(yīng)用領(lǐng)域:涵蓋基礎(chǔ)研究、臨床診斷及工業(yè)應(yīng)用。


七、總結(jié)

賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能、靈活的qPCR儀器,適用于多種分子生物學(xué)研究和臨床診斷需求。其先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)技術(shù)、高靈敏度、寬動(dòng)態(tài)范圍和高通量實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?,使其成為基因檢測(cè)、病原體分析和精準(zhǔn)醫(yī)療研究的理想選擇。CFX96不僅能滿足現(xiàn)代科研對(duì)高精度數(shù)據(jù)的需求,也能在未來的分子診斷和生物技術(shù)開發(fā)中繼續(xù)發(fā)揮重要作用,為推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步提供強(qiáng)有力的支持。


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