賽默飛 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 是一款高精度、自動(dòng)化的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析工具,結(jié)合了熒光顯微鏡技術(shù)和先進(jìn)的圖像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的詳細(xì)教程,幫助用戶快速上手并有效利用儀器進(jìn)行細(xì)胞分析。
1. 開始前準(zhǔn)備
在使用Countess 3 FL之前,確保儀器和樣本準(zhǔn)備好。
1.1 儀器準(zhǔn)備
接通電源:確保儀器連接電源,并開啟電源按鈕。
檢查儀器狀態(tài):在儀器啟動(dòng)后,等待系統(tǒng)自檢完成。此時(shí)屏幕上會(huì)顯示儀器的歡迎界面,確認(rèn)沒有錯(cuò)誤提示。
清潔樣本腔和顯微鏡鏡頭:使用適當(dāng)?shù)那鍧嵐ぞ撸ㄈ鐭o塵布和清潔液)清潔儀器的顯微鏡鏡頭和樣本腔,避免灰塵影響結(jié)果。
1.2 樣本準(zhǔn)備
準(zhǔn)備細(xì)胞懸液:確保細(xì)胞懸液均勻,必要時(shí)使用離心機(jī)沉淀細(xì)胞,去除上清液。
選擇適當(dāng)?shù)娜玖?/strong>:根據(jù)需要使用臺(tái)盼藍(lán)或熒光染料(如Calcein-AM、PI等),將染料加入細(xì)胞懸液中,幫助區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞。
2. 操作步驟
2.1 啟動(dòng)儀器
打開 Countess 3 FL,并觸摸屏幕上的 "Start" 按鈕進(jìn)入主菜單。
在主菜單中,選擇適合你實(shí)驗(yàn)的計(jì)數(shù)模式(如臺(tái)盼藍(lán)染色、熒光染料分析等)。
2.2 樣本加載
將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液輕輕滴入計(jì)數(shù)板或樣品腔。確保液體的表面平整,避免氣泡干擾。
使用Countess 3 FL的專用樣品腔蓋住樣品,確保沒有氣泡。插入樣品腔到儀器的掃描區(qū)域。
2.3 設(shè)置計(jì)數(shù)參數(shù)
選擇適合的實(shí)驗(yàn)?zāi)J剑?/p>
調(diào)整其他實(shí)驗(yàn)設(shè)置(如增益、曝光時(shí)間等),以確保熒光信號(hào)清晰可見,細(xì)胞圖像清晰。
2.4 運(yùn)行計(jì)數(shù)
按下 “Start Counting" 按鈕,儀器將自動(dòng)開始圖像采集與分析。Countess 3 FL會(huì)掃描樣品中的細(xì)胞圖像,并進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別和計(jì)數(shù)。
在分析過程中,Countess 3 FL會(huì)自動(dòng)顯示細(xì)胞數(shù)量、活細(xì)胞和死細(xì)胞的比例、細(xì)胞大小分布等數(shù)據(jù)。
2.5 查看分析結(jié)果
分析完成后,儀器會(huì)自動(dòng)生成詳細(xì)的結(jié)果報(bào)告,并顯示在觸摸屏上。
查看報(bào)告:報(bào)告包括細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞比例等。你還可以查看細(xì)胞的大小分布、形態(tài)等詳細(xì)信息。
調(diào)整報(bào)告設(shè)置:根據(jù)需要,您可以選擇導(dǎo)出數(shù)據(jù)或調(diào)整報(bào)告設(shè)置。
2.6 導(dǎo)出數(shù)據(jù)
點(diǎn)擊“Export"按鈕,將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)出為 CSV 格式文件。
通過USB或網(wǎng)絡(luò)將文件轉(zhuǎn)移到電腦上,以進(jìn)行進(jìn)一步分析。
3. 高級(jí)功能與設(shè)置
3.1 多通道熒光染料分析
如果您正在使用多個(gè)熒光染料(如Calcein-AM、PI、Hoechst等),可以選擇適當(dāng)?shù)臒晒馔ǖ肋M(jìn)行細(xì)胞分析:
在設(shè)置中選擇“Fluorescent Mode"并每個(gè)通道的染料類型。
儀器會(huì)自動(dòng)切換不同的熒光通道,識(shí)別不同的細(xì)胞群體(例如,活細(xì)胞、死細(xì)胞、細(xì)胞核等)。
3.2 細(xì)胞大小和形態(tài)分析
通過細(xì)胞大小和形態(tài)分析功能,您可以評(píng)估細(xì)胞的健康狀況和群體分布:
選擇“Size Distribution"模式,儀器會(huì)根據(jù)細(xì)胞大小對(duì)樣本進(jìn)行分類,并生成直方圖。
進(jìn)一步分析細(xì)胞的形態(tài)特征,觀察細(xì)胞是否有異常形態(tài)(如細(xì)胞碎片等)。
4. 維護(hù)與保養(yǎng)
4.1 清潔
定期清潔Countess 3 FL儀器,特別是顯微鏡鏡頭和樣品腔:
用無塵布清潔顯微鏡鏡頭,避免灰塵和污漬影響圖像質(zhì)量。
清潔樣品腔,確保沒有殘留的樣品或染料,避免交叉污染。
4.2 校準(zhǔn)
Countess 3 FL具有自動(dòng)校準(zhǔn)功能,但建議定期進(jìn)行校準(zhǔn)檢查,確保儀器的計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確:
使用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞懸液進(jìn)行校準(zhǔn),檢查儀器計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
根據(jù)儀器使用頻率,建議每隔一段時(shí)間重新校準(zhǔn)。
4.3 軟件更新
定期檢查并更新儀器的操作系統(tǒng)和分析軟件:
根據(jù)賽默飛公司發(fā)布的軟件更新通知,下載并安裝最新的軟件版本,確保儀器的功能和性能得到優(yōu)化。
5. 常見問題解答
5.1 儀器無法啟動(dòng)
5.2 樣本圖像模糊
5.3 計(jì)數(shù)結(jié)果與預(yù)期差異
檢查染料的使用是否正確,確保染料與細(xì)胞的匹配。
確保選擇了正確的計(jì)數(shù)模式,并且設(shè)置了合適的參數(shù)(如熒光增益、曝光時(shí)間等)。
確保樣品均勻,并且細(xì)胞濃度在適合儀器測量的范圍內(nèi)。
總結(jié)
賽默飛Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過自動(dòng)化操作、熒光顯微技術(shù)、智能圖像分析,提供高效、精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析功能。通過本文提供的步驟,您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL進(jìn)行細(xì)胞研究。定期維護(hù)、更新和適當(dāng)?shù)脑O(shè)置調(diào)整,能夠確保儀器長期穩(wěn)定地為您提供精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。