賽默飛 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 是一款高精度、自動(dòng)化的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析工具，結(jié)合了熒光顯微鏡技術(shù)和先進(jìn)的圖像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的詳細(xì)教程，幫助用戶快速上手并有效利用儀器進(jìn)行細(xì)胞分析。

1. 開始前準(zhǔn)備

在使用Countess 3 FL之前，確保儀器和樣本準(zhǔn)備好。

1.1 儀器準(zhǔn)備

1. 接通電源：確保儀器連接電源，并開啟電源按鈕。

2. 檢查儀器狀態(tài)：在儀器啟動(dòng)后，等待系統(tǒng)自檢完成。此時(shí)屏幕上會(huì)顯示儀器的歡迎界面，確認(rèn)沒有錯(cuò)誤提示。

3. 清潔樣本腔和顯微鏡鏡頭：使用適當(dāng)?shù)那鍧嵐ぞ撸ㄈ鐭o塵布和清潔液）清潔儀器的顯微鏡鏡頭和樣本腔，避免灰塵影響結(jié)果。

1.2 樣本準(zhǔn)備

1. 準(zhǔn)備細(xì)胞懸液：確保細(xì)胞懸液均勻，必要時(shí)使用離心機(jī)沉淀細(xì)胞，去除上清液。

2. 選擇適當(dāng)?shù)娜玖?/strong>：根據(jù)需要使用臺(tái)盼藍(lán)或熒光染料（如Calcein-AM、PI等），將染料加入細(xì)胞懸液中，幫助區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞。

2. 操作步驟

2.1 啟動(dòng)儀器

1. 打開 Countess 3 FL，并觸摸屏幕上的 "Start" 按鈕進(jìn)入主菜單。

2. 在主菜單中，選擇適合你實(shí)驗(yàn)的計(jì)數(shù)模式（如臺(tái)盼藍(lán)染色、熒光染料分析等）。

2.2 樣本加載

1. 將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液輕輕滴入計(jì)數(shù)板或樣品腔。確保液體的表面平整，避免氣泡干擾。

2. 使用Countess 3 FL的專用樣品腔蓋住樣品，確保沒有氣泡。插入樣品腔到儀器的掃描區(qū)域。

2.3 設(shè)置計(jì)數(shù)參數(shù)

1. 選擇適合的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑?/p>

• 普通細(xì)胞計(jì)數(shù)模式：選擇“臺(tái)盼藍(lán)"或其他染料檢測活死細(xì)胞的模式。

• 熒光染料模式：如果使用了熒光染料（如Calcein-AM、PI等），選擇相應(yīng)的熒光通道（如綠色或紅色），以便通過熒光信號(hào)分析細(xì)胞活性。

2. 調(diào)整其他實(shí)驗(yàn)設(shè)置（如增益、曝光時(shí)間等），以確保熒光信號(hào)清晰可見，細(xì)胞圖像清晰。

2.4 運(yùn)行計(jì)數(shù)

1. 按下 “Start Counting" 按鈕，儀器將自動(dòng)開始圖像采集與分析。Countess 3 FL會(huì)掃描樣品中的細(xì)胞圖像，并進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別和計(jì)數(shù)。

2. 在分析過程中，Countess 3 FL會(huì)自動(dòng)顯示細(xì)胞數(shù)量、活細(xì)胞和死細(xì)胞的比例、細(xì)胞大小分布等數(shù)據(jù)。

2.5 查看分析結(jié)果

1. 分析完成后，儀器會(huì)自動(dòng)生成詳細(xì)的結(jié)果報(bào)告，并顯示在觸摸屏上。

2. 查看報(bào)告：報(bào)告包括細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞比例等。你還可以查看細(xì)胞的大小分布、形態(tài)等詳細(xì)信息。

3. 調(diào)整報(bào)告設(shè)置：根據(jù)需要，您可以選擇導(dǎo)出數(shù)據(jù)或調(diào)整報(bào)告設(shè)置。

2.6 導(dǎo)出數(shù)據(jù)

1. 點(diǎn)擊“Export"按鈕，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)出為 CSV 格式文件。

2. 通過USB或網(wǎng)絡(luò)將文件轉(zhuǎn)移到電腦上，以進(jìn)行進(jìn)一步分析。

3. 高級(jí)功能與設(shè)置

3.1 多通道熒光染料分析

如果您正在使用多個(gè)熒光染料（如Calcein-AM、PI、Hoechst等），可以選擇適當(dāng)?shù)臒晒馔ǖ肋M(jìn)行細(xì)胞分析：

1. 在設(shè)置中選擇“Fluorescent Mode"并每個(gè)通道的染料類型。

2. 儀器會(huì)自動(dòng)切換不同的熒光通道，識(shí)別不同的細(xì)胞群體（例如，活細(xì)胞、死細(xì)胞、細(xì)胞核等）。

3.2 細(xì)胞大小和形態(tài)分析

通過細(xì)胞大小和形態(tài)分析功能，您可以評(píng)估細(xì)胞的健康狀況和群體分布：

1. 選擇“Size Distribution"模式，儀器會(huì)根據(jù)細(xì)胞大小對(duì)樣本進(jìn)行分類，并生成直方圖。

2. 進(jìn)一步分析細(xì)胞的形態(tài)特征，觀察細(xì)胞是否有異常形態(tài)（如細(xì)胞碎片等）。

4. 維護(hù)與保養(yǎng)

4.1 清潔

定期清潔Countess 3 FL儀器，特別是顯微鏡鏡頭和樣品腔：

1. 用無塵布清潔顯微鏡鏡頭，避免灰塵和污漬影響圖像質(zhì)量。

2. 清潔樣品腔，確保沒有殘留的樣品或染料，避免交叉污染。

4.2 校準(zhǔn)

Countess 3 FL具有自動(dòng)校準(zhǔn)功能，但建議定期進(jìn)行校準(zhǔn)檢查，確保儀器的計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確：

1. 使用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞懸液進(jìn)行校準(zhǔn)，檢查儀器計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

2. 根據(jù)儀器使用頻率，建議每隔一段時(shí)間重新校準(zhǔn)。

4.3 軟件更新

定期檢查并更新儀器的操作系統(tǒng)和分析軟件：

1. 根據(jù)賽默飛公司發(fā)布的軟件更新通知，下載并安裝最新的軟件版本，確保儀器的功能和性能得到優(yōu)化。

5. 常見問題解答

5.1 儀器無法啟動(dòng)

• 確保電源插頭連接正確，電源開關(guān)已打開。

• 檢查電源指示燈是否亮起，確保電源正常。

5.2 樣本圖像模糊

• 檢查顯微鏡鏡頭是否干凈，如有灰塵，使用無塵布輕輕擦拭。

• 檢查樣品腔，確保沒有氣泡，并確保樣本液面平整。

5.3 計(jì)數(shù)結(jié)果與預(yù)期差異

• 檢查染料的使用是否正確，確保染料與細(xì)胞的匹配。

• 確保選擇了正確的計(jì)數(shù)模式，并且設(shè)置了合適的參數(shù)（如熒光增益、曝光時(shí)間等）。

• 確保樣品均勻，并且細(xì)胞濃度在適合儀器測量的范圍內(nèi)。

總結(jié)

賽默飛Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過自動(dòng)化操作、熒光顯微技術(shù)、智能圖像分析，提供高效、精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析功能。通過本文提供的步驟，您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL進(jìn)行細(xì)胞研究。定期維護(hù)、更新和適當(dāng)?shù)脑O(shè)置調(diào)整，能夠確保儀器長期穩(wěn)定地為您提供精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。