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Data download賽默飛(Thermo Fisher Scientific)旗下的Applied Biosystems 7500型實時熒光定量PCR儀(7500 Real-Time PCR System)是一款高性能的實時熒光定量PCR(qPCR)儀器。它被廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原檢測、突變檢測、基因拷貝數(shù)分析等多個分子生物學(xué)研究和臨床檢測領(lǐng)域。7500型PCR儀結(jié)合精確的光學(xué)檢測系統(tǒng)、智能化數(shù)據(jù)分析軟件和穩(wěn)定的溫控系統(tǒng),可提供高靈敏度和高通量的qPCR檢測,滿足科研、醫(yī)療及工業(yè)實驗室的需求。
7500型實時熒光定量PCR儀在光學(xué)系統(tǒng)、檢測通道、數(shù)據(jù)分析等方面具有明顯的優(yōu)勢,適用于各種PCR實驗。
優(yōu)化的光學(xué)設(shè)計,能夠準(zhǔn)確采集熒光信號,提高檢測靈敏度。
支持多種熒光檢測方式,兼容SYBR Green染料和TaqMan探針技術(shù)。
快速數(shù)據(jù)采集,提高擴(kuò)增曲線的準(zhǔn)確性,確保數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。
支持5個熒光通道,能夠進(jìn)行多重PCR實驗,檢測多個目標(biāo)基因。
兼容多種熒光染料(FAM™、VIC®、ROX™、SYBR® Green等),適用于不同類型的實驗。
高效的Peltier熱循環(huán)系統(tǒng),確保樣品孔間溫度均一性,提高擴(kuò)增的重復(fù)性和可靠性。
快速升降溫,縮短實驗時間,提高工作效率。
Applied Biosystems專用軟件,支持標(biāo)準(zhǔn)曲線分析、相對定量分析(2-ΔΔCt方法)、絕對定量分析等數(shù)據(jù)處理功能。
直觀的用戶界面,可自動計算Ct值、熔解曲線分析,支持導(dǎo)出實驗報告。
支持96孔板,適用于中等通量實驗需求。
兼容各種PCR反應(yīng)體系,包括TaqMan探針法、SYBR Green熒光染料法。
通過優(yōu)化的檢測和溫控系統(tǒng),保證數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性和重復(fù)性,適用于科研實驗、臨床診斷、環(huán)境檢測等領(lǐng)域。
參數(shù) | 詳細(xì)信息 |
---|---|
熒光通道 | 5個(支持多重PCR) |
檢測模式 | SYBR Green、TaqMan探針 |
PCR反應(yīng)板 | 96孔板 |
溫控精度 | ±0.25°C |
熒光檢測范圍 | FAM™, VIC®, ROX™, NED™, TAMRA™ |
數(shù)據(jù)分析 | 絕對定量、相對定量、基因分型、熔解曲線分析 |
軟件支持 | Applied Biosystems 7500 Software |
升降溫速率 | 3.5°C/s |
通過實時PCR檢測特定基因的表達(dá)水平,適用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)等領(lǐng)域。
可使用SYBR Green染料法或TaqMan探針法進(jìn)行高靈敏度的基因表達(dá)定量分析。
7500型PCR儀可檢測細(xì)菌、病毒(如SARS-CoV-2、流感病毒、HIV等),適用于傳染病檢測。
高靈敏度檢測可確保低拷貝病原DNA/RNA的可靠檢測。
適用于SNP(單核苷酸多態(tài)性)分析、點突變檢測、腫瘤基因突變研究等。
結(jié)合TaqMan探針技術(shù),可實現(xiàn)高特異性的基因分型分析。
適用于DNA指紋鑒定、食品安全檢測(如轉(zhuǎn)基因食品檢測)。
通過實時PCR技術(shù),可快速鑒定樣本來源,提高實驗效率。
7500型PCR儀的使用流程如下:
提取DNA或RNA,進(jìn)行濃度測定和純化。
選擇合適的PCR反應(yīng)體系(SYBR Green或TaqMan探針)。
配制PCR反應(yīng)液,包括引物、探針、dNTPs、PCR緩沖液、熒光染料或探針。
將PCR反應(yīng)體系分裝至96孔PCR板,每孔體積通常為10-50 µL。
使用封膜密封PCR板,避免交叉污染。
在7500 PCR儀的軟件中創(chuàng)建實驗:
設(shè)定PCR反應(yīng)條件(變性、退火、延伸)。
選擇熒光通道并設(shè)置數(shù)據(jù)采集模式。
啟動PCR實驗,實時監(jiān)測熒光信號變化。
通過儀器自帶的軟件分析Ct值,計算基因表達(dá)水平或DNA拷貝數(shù)。
生成擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)行數(shù)據(jù)比對。
**Ct(閾值循環(huán)數(shù))**表示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測閾值,Ct值越低,表示初始DNA/RNA濃度越高。
用于基因表達(dá)分析、病原體檢測等實驗。
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算DNA/RNA拷貝數(shù),適用于病毒載量檢測等研究。
比較實驗組和對照組基因表達(dá)水平,廣泛應(yīng)用于藥物研究、癌癥生物標(biāo)志物分析。
確保樣品純度:DNA/RNA質(zhì)量影響擴(kuò)增效率,應(yīng)避免蛋白或其他雜質(zhì)污染。
正確設(shè)置熒光通道:不同的熒光探針需要匹配相應(yīng)的檢測通道。
避免交叉污染:使用無RNA/DNA酶的移液器和試劑,嚴(yán)格遵循無菌操作流程。
優(yōu)化引物設(shè)計:避免二聚體形成,提高PCR特異性和擴(kuò)增效率。
賽默飛7500型實時熒光定量PCR儀憑借高靈敏度的熒光檢測、精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)、強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析功能,已成為基因組研究、病原檢測、臨床診斷等領(lǐng)域的常見PCR設(shè)備。其多通道檢測、兼容多種熒光探針、支持高通量檢測的特點,使其適用于從基礎(chǔ)研究到應(yīng)用檢測的各種實驗需求。通過合理優(yōu)化實驗條件,7500型PCR儀能夠提供高精度、穩(wěn)定可靠的PCR定量分析結(jié)果,為科研人員和臨床醫(yī)生提供強(qiáng)有力的實驗支持。