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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心試劑免費(fèi)試用實(shí)了個(gè)驗(yàn)轉(zhuǎn)膜相關(guān)實(shí)了個(gè)驗(yàn)5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)

實(shí)了個(gè)驗(yàn)5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

實(shí)了個(gè)驗(yàn)5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)是一種關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)試劑,特別適合需要重復(fù)使用Western blot印跡膜的研究

更新時(shí)間:2024-08-24
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5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)(10 mL)是一種專門設(shè)計(jì)用于再生和重復(fù)使用Western blot蛋白印跡膜的試劑。該再生液通過溫和的化學(xué)處理,能夠去除膜上的抗體和探針,同時(shí)保持目標(biāo)蛋白的完整性,從而使膜可以重新用于新的抗體孵育和檢測(cè)。這種再生液特別適合用于珍貴樣品的Western blot實(shí)驗(yàn),能夠節(jié)省試劑和時(shí)間,提供一種經(jīng)濟(jì)高效的實(shí)驗(yàn)方法。

1. 實(shí)了個(gè)驗(yàn)5× 蛋白印跡膜再生液(Mild):產(chǎn)品概述

5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)是一種高濃縮試劑,使用時(shí)需要稀釋至1×工作濃度。它的主要功能是去除蛋白印跡膜上已經(jīng)結(jié)合的抗體,而不影響膜上已轉(zhuǎn)移的目標(biāo)蛋白。與強(qiáng)效再生液相比,Mild版本設(shè)計(jì)為溫和的處理方式,適合于那些對(duì)強(qiáng)效化學(xué)處理敏感的蛋白質(zhì)。此再生液常用于在檢測(cè)多個(gè)抗體或調(diào)整檢測(cè)條件時(shí),重復(fù)利用同一膜,以驗(yàn)證或補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2. 實(shí)了個(gè)驗(yàn)5× 蛋白印跡膜再生液(Mild):主要成分與功能

再生液的成分通常包括以下幾類化學(xué)試劑,它們共同作用,幫助溫和地去除抗體,同時(shí)保護(hù)目標(biāo)蛋白:

2.1 溫和去污劑

溫和去污劑能夠有效去除膜上的抗體和探針,而不會(huì)破壞或影響蛋白質(zhì)的結(jié)合和結(jié)構(gòu)。這種去污劑確保了膜的再生過程既又不損傷目標(biāo)蛋白。

2.2 低濃度酸或堿

再生液可能含有低濃度的酸或堿,幫助破壞抗體與膜之間的非共價(jià)鍵結(jié)合。通過調(diào)整pH值,抗體被從膜上剝離,而膜上的蛋白質(zhì)保持不變。

2.3 蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑

蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑在再生過程中保護(hù)目標(biāo)蛋白,防止其在去除抗體時(shí)發(fā)生降解或變性。這些穩(wěn)定劑確保目標(biāo)蛋白在隨后的檢測(cè)中仍能保持活性和結(jié)構(gòu)完整。

3. 應(yīng)用領(lǐng)域

3.1 Western Blot膜再利用

5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)主要用于Western blot實(shí)驗(yàn)中的膜再利用。它允許研究人員在進(jìn)行多次檢測(cè)時(shí)重復(fù)使用同一塊膜,特別適合在需要多次抗體檢測(cè)或?qū)Ρ炔煌瑢?shí)驗(yàn)條件的情況下使用。

3.2 多重抗體檢測(cè)

再生液使得研究人員能夠在一塊膜上檢測(cè)多個(gè)不同的蛋白或使用不同的抗體進(jìn)行多重檢測(cè)。這對(duì)于樣品量有限或?qū)贵w性能進(jìn)行比較時(shí)非常有用。

3.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化

在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件(如抗體濃度、孵育時(shí)間等)時(shí),使用再生液能夠避免重新制備印跡膜,節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間和資源。

4. 使用方法

使用5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)進(jìn)行膜再生的步驟如下:

  1. 再生液稀釋:將5×再生液按1:5的比例稀釋至1×工作濃度。根據(jù)膜的大小準(zhǔn)備足夠量的再生液,確保膜能夠浸沒。

  2. 去除抗體:將膜放入1×再生液中,輕輕搖動(dòng),室溫孵育5-10分鐘(具體時(shí)間視抗體的結(jié)合強(qiáng)度和膜的敏感性而定)。再生液應(yīng)覆蓋整個(gè)膜,確保均勻處理。

  3. 沖洗膜:孵育結(jié)束后,用PBS或TBS緩沖液多次洗滌膜(通常3次,每次5分鐘),以去除殘留的再生液和抗體。

  4. 檢測(cè)再生效果:建議用少量PBS/TBS或其他適當(dāng)?shù)木彌_液孵育膜,檢測(cè)再生效果。如果需要,可以再次進(jìn)行再生處理。

  5. 重新檢測(cè):再生后的膜可以重新進(jìn)行抗體孵育,重復(fù)Western blot檢測(cè)過程。

5. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

5.1 溫和高效

Mild再生液的配方經(jīng)過優(yōu)化,確保在有效去除抗體的同時(shí),不會(huì)對(duì)膜上的目標(biāo)蛋白造成損傷,特別適合敏感蛋白的再生處理。

5.2 節(jié)省成本

通過重復(fù)使用同一塊印跡膜,顯著減少了實(shí)驗(yàn)耗材和抗體的消耗,降低了實(shí)驗(yàn)成本。

5.3 時(shí)間高效

再生液的使用簡(jiǎn)化了多次檢測(cè)的過程,避免了重新制備印跡膜的繁瑣步驟,縮短了實(shí)驗(yàn)周期。

5.4 適用性廣泛

適用于PVDF和硝酸纖維素膜,適用于大多數(shù)Western blot實(shí)驗(yàn)的膜再生需求。

6. 注意事項(xiàng)

  • 稀釋與使用:再生液使用前必須按要求稀釋至1×工作濃度,并確保膜浸沒在再生液中。

  • 多次再生:雖然Mild再生液溫和,但建議膜的再生次數(shù)不要過多,以防止膜上蛋白質(zhì)的逐漸流失或降解。

  • 存儲(chǔ)條件:5×再生液應(yīng)存放在4°C,并避免長(zhǎng)期暴露在光線下,以保證其活性。

7. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)例

在研究腫瘤相關(guān)蛋白的表達(dá)時(shí),研究人員通過使用5× 蛋白印跡膜再生液(Mild),多次再生同一塊膜以檢測(cè)不同的抗體。這不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和成本,還允許他們?cè)谕粭l件下對(duì)比不同蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,提高了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和可比性。

在信號(hào)通路分析中,研究人員使用再生液在同一塊膜上檢測(cè)不同磷酸化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。再生液有效去除了前一次檢測(cè)的抗體,使得膜在多次使用后仍能提供清晰的檢測(cè)結(jié)果。

8. 總結(jié)

5× 蛋白印跡膜再生液(Mild)(10 mL)是一種關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)試劑,特別適合需要重復(fù)使用Western blot印跡膜的研究。其溫和的配方確保在有效去除抗體的同時(shí),不會(huì)對(duì)膜上的目標(biāo)蛋白造成損傷,從而能夠在多次檢測(cè)中保持膜的完整性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。通過使用該再生液,研究人員能夠大幅減少實(shí)驗(yàn)耗材,提高實(shí)驗(yàn)效率,并獲得更可靠的多重檢測(cè)結(jié)果。



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